ABSTRACT
Introducción: la leishmaniasis es la enfermedad protozoaria responsable de la mayor morbilidad y mortalidad en la población mundial. Los medicamentos utilizados para su tratamiento presentan serios problemas, entre estos la alta toxicidad y los efectos secundarios severos. Por otro lado, la producción de radicales libres debido al estrés oxidativo ocasiona la oxidación de lípidos, proteínas, DNA y enzimas que son responsables del daño del tejido celular. Algunas especies de la familia Piperaceae presentan un amplio espectro de actividades biológicas, lo cual incita a la exploración de la propiedad antioxidante y antiprotozoaria en miembros del género Piper, como una alternativa en la búsqueda de nuevos medicamentos contra la leishmaniasis y de nuevos antioxidantes naturales. Objetivo: evaluar la actividad leishmanicida, citotóxica y antioxidante de extractos alcohólicos y no alcohólicos de Piper daniel-gonzalezii Trel. Métodos: después de secado el material vegetal (tallos y hojas), se realizó un proceso de extracción por percolación con etanol. La solución obtenida se concentró a presión reducida y con el extracto crudo de las hojas se hizo la partición por cromatografía en columna, con solventes de diferente polaridad como hexano, diclorometano y acetato de etilo. Se evaluó la actividad leishmanicida en amastigotes axénicos e intracelulares para cada fracción y cada extracto etanólico. Se evaluó la citotoxicidad en células U-937 y la capacidad antioxidante mediante el método FRAP (ferric reducing ability of plasma). Resultados: la fracción obtenida por percolación con hexano (fracción de desengrase) y el extracto etanólico de los tallos resultaron los más activos contra amastigotes intracelulares de Leishmania panamensis, lo cual las hace fracciones promisorias en la búsqueda de nuevos compuestos con actividad leishmanicida. Los dos extractos y todas las fracciones, con excepción de la fracción de desengrase, mostraron una alta capacidad reductora, por lo tanto, estas fracciones, principalmente la de acetato de etilo, se consideran como potenciales fuentes de sustancias antioxidantes. Conclusiones: los resultados muestran que Piper daniel-gonzalezii presenta propiedades tanto leishmanicida como reductora, por lo cual tiene un alto potencial como fuente de compuestos para el desarrollo de nuevas alternativas terapéuticas contra la leishmaniasis, o como una fuente natural de antioxidantes con un alto uso potencial en la industria farmacéutica y de alimentos.
Introduction: leishmaniasis is the protozoal disease with the highest morbidity and mortality worldwide. The medications used to treat it have serious drawbacks, among which are their high toxicity and severe side effects. On the other hand, production of free radicals due to oxidative stress results in the oxidation of lipids, proteins, DNA and enzymes responsible for cell tissue damage. Some species of the family Piperaceae present a broad spectrum of biological activities, inviting exploration of the antioxidant and antiprotozoal properties of members of the genus Piper as an alternative in the search for new drugs against leishmaniasis and new natural antioxidants. Objective: evaluate the leishmanicidal, cytotoxic and antioxidant activity of alcoholic and non-alcoholic extracts of Piper daniel-gonzalezii Trel. Methods: drying of the plant material (stems and leaves) was followed by extraction by percolation with ethanol. The solution thus obtained was concentrated under reduced pressure, and the crude leaf extract was subjected to partition column chromatography with solvents of varying polarity, such as hexane, dichloromethane and ethyl acetate. Leishmanicidal activity in axenic and intracellular amastigotes was evaluated for each fraction and ethanolic extract. An evaluation was conducted of cytotoxicity in U-937 cells and of antioxidant capacity by the FRAP (ferric reducing ability of plasma) method. Results: the fraction obtained by percolation with hexane (degreasing fraction) and the ethanolic stem extract were the most active against intracellular amastigotes of Leishmania panamensis, a fact that turns them into promising fractions in the search for new compounds with leishmanicidal activity. The two extracts and all the fractions, except for the degreasing fraction, exhibited a high reducing capacity. These fractions, particularly the ethyl acetate fraction, are therefore considered to be potential sources of antioxidant substances. Conclusions: results show that Piper daniel-gonzalezii has both leishmanicidal and reducing properties, and thus great potential either as a source of compounds for developing new therapeutic alternatives against leishmaniasis, or as a natural source of antioxidants with great potential for use in the pharmaceutical and food industries.
ABSTRACT
INTRODUCCIÓN: la búsqueda de nuevos compuestos antioxidantes naturales ha sido de gran interés para la investigación dado que interrumpen el proceso de oxidación por vía radicalaria de lípidos, proteínas, ADN y enzimas. El género Calophyllum perteneciente a la familia Clusiaceae, produce una gran variedad de metabolitos secundarios con características antioxidantes; los flavonoides, las coumarinas y las xantonas resultan los compuestos más reportados. Las especies de este género pueden ser una fuente de antioxidantes potenciales. OBJETIVO: determinar la actividad antioxidante de extractos de diferente polaridad de las especies Calophyllum cf. brasiliense Cambess, Calophyllum inophyllum L., Calophyllum sp. MÉTODOS: se realizó un proceso de extracción del material vegetal por percolación con solventes de diferente polaridad: hexano, diclorometano, acetato de etilo y metanol, se concentró a presión reducida y se monitoreó por cromatografía en capa delgada. La evaluación de la capacidad antioxidante se determinó con diferentes metodologías: fenoles totales, ABTS (2,2-azinobis-[3 etilbenzotiazolin-6-sulfónico]), DPPH (1,1-difenil2-picrilhidracil), FRAP (ferric reducing/antioxidant power) y en algunas muestras seleccionadas ORAC (oxygen radical absorbance capacity). RESULTADOS: las muestras que contienen compuestos fenólicos con una alta capacidad reductora fueron CBTExtM, CNHTExtM, CRHTExtA, CRHTExtM, CBHExtA y CBHExtM, que además, poseen valores ORAC muy altos comparados con otros sustratos, el extracto que presentó mejores valores fue CBTExtM. La técnica FRAP describe muy bien el fenómeno oxidativo en los extractos CSHTExtA, CBHExtA, CIHTExtM, CSHTExtM y CIHTExtM; en (DPPH) el extracto que presentó altos valores de TEAC fue CSHTExtA. El extracto CBTExtM presentó los mejores valores de inhibición del radical ABTS. CONCLUSIONES: los extractos polares y medianamente polares de las tres especies de Calophyllum presentaron alta actividad antioxidante en las metodologías evaluadas.
INTRODUCTION: the search of new natural antioxidant compounds has been of great interest for research since they interrupt the oxidation process via radical pathway of lipid, proteins, DNA and enzymes. The Calophyllum genus belongs to Clusiaceae family producing a great variety of secondary metabolites with antioxidant features; the flavonoids, the coumarins and the xanthones are the more reported compounds. The species from this genus may be a potential antioxidant source. OBJECTIVE: to determine the antioxidant activity of extracts from different polarity of Calophyllum cf. brasiliense Cambess, Calophyllum inophyllum L., Calophyllum sp. METHODS: a percolation process was carried out from the vegetal material by decoction using solvent of different polarity: hexane, dichloromethane, and ethyl acetate and methanol, concentrated at decreased pressure and monitored by thin layer chromatography (TLC). The antioxidant capacity assessment was determined using different methodologies: total phenols, ABTS (2,2-azinobis-[3 ethylbenzothiazolin-6-sulphoni]), FRAP (ferric reducing/antioxidant power) and in some selected ORAC samples (oxygen radical absorbance capacity). RESULTS: the samples containing phenol compounds with a high reducing capacity were CBTExtM, CNHTExtM, CRHTExtA, CRHTExtM, CBHExtA and CBHExtM, which also have very high ORAC values compared with other substrates; the extract with better values was the CBTExtM. The FRAP technique describes very well the oxidative phenomenon in extracts CHSTExtA, CBHExtA, CIHTExtM, CSHTExtM and CIHTExtM: in DPPH) the extract showing TEAC high values was the CSHTExtA. The CBTExtM extract showed the better inhibition values of ABTS radical. CONCLUSIONS: the polar and moderately polar extracts from the three species of Calophyllum showed a high antioxidant activity in the assessed methodologies.